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一、环境与硬件准备
1. 环境控制
温度：20–25℃，波动≤±1℃；湿度：40%–60%，避免结露。
远离振动源（如离心机、风机）、强电磁场与直吹气流，台面稳固防滑，机械泵独立放置，避免与仪器接触传振。
电源：配 UPS 防断电；主断路器置On，电子服务开关设Operating ModeThermo Fisher。
2. 气体与真空
氮气：纯度≥99.999%，压力 800±30 kPa（8±0.3 bar），每日检漏，钢瓶留余压≥500 kPa。
真空启动：开机抽真空≥2 小时，UHV 低于 10⁻⁷ mbar；Bakeout（12 小时）后，FT 分析器稳定≥8 小时，真空达 10⁻¹⁰ mbar 级再测试。
频繁开关机：短期（1–3 天）保持真空；长期（>1 周）关机需按规程放空，保护涡轮泵。
二、开机与校准（数据准确核心）
1. 开机流程
上电后启动系统，机械泵→涡轮泵→真空建立；断电恢复后若已放空，需重新 Bakeout。
进入On 模式至少 90 分钟后再校准，避免直接从 Off 模式校准Thermo Fisher。
2. 校准要求
日常：每日做质量校准；受控环境可每周 1 次；确保 24 小时内质量偏差＜3 ppm（外标）、1 ppm（内标，锁质量）Thermo Fisher Scientific。
月度：系统校准（含四极杆隔离质量与分辨率）Thermo Fisher Scientific。
调谐合格指标：
正离子：NL＞1.0e8、IT＜5 ms，特征峰（m/z 195、524、922–1822）清晰。
负离子：NL＞1.0e8、IT＜5 ms，特征峰（m/z 265、514、1280–1780）清晰Thermo Fisher。
TIC 波动＜10%（稳定喷雾关键）Thermo Fisher Scientific。
3. 校准操作
正 / 负离子模式分别用对应校准液（赛默飞货号 88323/88324），以 5 μL/min 输注，确认喷雾稳定再执行Thermo Fisher。
校准后用Evaluate 功能验证，不合格需重复校准Thermo Fisher。
三、样品与进样规范
1. 样品制备
浓度：单样品≤10 μg/mL，过高易污染离子源。
溶剂：优选色谱级甲醇 / 水；难溶物先用二氯甲烷等溶解，再用甲醇 / 水稀释；禁用强酸强碱、难挥发溶剂（如 DMSO、DMF、表面活性剂）。
过滤：配置后经 0.22 μm 滤膜过滤，去除不溶物。
体积：样品瓶体积≥0.5 mL；低于 0.5 mL 需用内插管，避免空针。
2. 进样操作
使用匹配规格样品瓶、瓶盖与预切割垫，避免损坏进样针；瓶盖适度拧紧，过紧易引发负压空针。
进样前检查管路无气泡、无漏液，流速与梯度符合方法要求。
四、方法与参数设置
1. 基础参数
扫描模式：根据需求选 Full MS、SIM、AIF-MS/MS 等；分辨率设 35,000 及以上时，正负扫描循环约 1 秒Thermo Fisher Scientific。
AGC 目标：过高易导致空间电荷 / 聚束效应，过低则灵敏度下降；参考默认模板，按需微调Thermo Fisher Scientific。
注射时间（IT）：与 AGC 联动，避免过长导致污染或信号饱和。
极性切换：支持，切换时间约 250 ms；正负同时扫描时，需匹配循环时间需求Thermo Fisher Scientific。
2. 离子源设置（H-ESI 为例）
鞘气（Sheath Gas）：正离子 5–10，负离子 7–12；辅助气（Aux Gas）正离子 2、负离子适量，以 TIC 稳定为准Thermo Fisher Scientific。
喷雾电压：正离子约 4 kV，喷雾电流～0.9 μA；毛细管温度 320℃，S-lens RF 水平 50（参考值，按需优化）Thermo Fisher。
离子传输管（ITT）：根据污染频率更换，信号下降 / 背景升高 / 源压异常时及时清洁或更换Thermo Fisher Scientific。
五、日常维护与污染控制
1. 日常清洁
每日：清洁离子源腔体、喷雾针、样品盘；检查毛细管入口无堵塞。
每周：清洁样品瓶架、进样针；检查气路密封。
离子源清洁：取下腔体、加热模块、毛细管，用 50% 甲醇水超声 15 分钟，晾干后安装。
2. 定期维护
| 周期 | 维护内容 |
|---|---|
| 6–12 个月 | 更换机械泵油（用原装油，油位在刻度线间；不同品牌油需新油冲洗），清洁泵滤网，检查 密封 |
| 每 2000–300 样品 / 年度 | 深度清洁离子光学部件（透镜、多极杆），检查电子倍增器（增益下降明显时更换） |
| 年度 | 2 次专业保养（离子源 / 透镜 / 传输杆清洗、真空系统检查、液相校准、电气检测） |
六、关机与数据管理
1. 关机规范
分析结束：推荐留Standby 模式，不直接关机，保障下次质谱精度Thermo Fisher。
长期关机：按规程放空真空，关闭氮气与电源，做好仪器防尘保护。
2. 数据安全
数据存至课题组专属文件夹，避免覆盖；U 盘拷贝前先格式化，防止病毒或格式冲突。
原始文件保留，定期备份，命名规范（含日期、样品、批次）。
七、安全与应急
高压风险：操作时禁止触碰离子源、高压接口；维护前断电并释放静电。
真空泄漏：若 Tune 显示压力异常，立即停机检漏，严禁带压操作。
污染应急：信号骤降 / 背景升高时，优先清洁离子源与 ITT；必要时联系赛默飞工程师。
