安捷伦LC-MSMS液相色谱--质谱联用仪--维护指南

液相色谱 - 质谱联用仪（LC-MS/MS）维护指导

一、日常维护（每日 / 每次实验前后）

（一）液相色谱（LC）部分

1. 流动相与溶剂管理

• 流动相需使用 色谱纯试剂，水需为超纯水（电阻率≥18.2 MΩ・cm），避免杂质污染色谱柱与离子源。

• 流动相配制后需 超声脱气 10-15 min（或使用在线脱气机），防止气泡进入泵体导致压力波动、峰形异常。

• 含缓冲盐（如 ammonium acetate、formic acid-ammonium formate 等）的流动相需 现配现用，避免微生物滋生（缓冲盐溶液放置不超过 48 h）；实验结束后需用无盐流动相（如甲醇 - 水、乙腈 - 水）冲洗管路与色谱柱，防止盐结晶堵塞。

• 溶剂瓶需定期清洗（每周 1 次），避免残留溶剂与杂质累积；瓶口密封垫若出现老化、渗漏，需及时更换。

2. 泵系统检查

• 开机前检查溶剂瓶液位，确保溶剂充足（不低于瓶身 1/3），避免泵空转损坏密封圈。

• 观察泵压力曲线：基线压力应稳定（波动≤±2%），若压力骤升（可能是管路堵塞、色谱柱污染）或骤降（可能是漏液、溶剂耗尽），需立即停机排查。

• 实验结束后，用 100% 甲醇或乙腈冲洗泵管路 15-30 min（流速 0.2-0.5 mL/min），保护泵密封垫与单向阀。

3. 进样器维护

• 每次实验前，用流动相或样品溶剂冲洗进样针 3-5 次，避免样品交叉污染。

• 定期检查进样针是否有堵塞、弯曲，若出现样品残留严重（峰形拖尾、重现性差），需用甲醇 - 水（1:1）或专用清洗液超声清洗进样针（10 min）。

• 检查进样口密封垫（ septum ）：若出现渗漏、磨损（进样时阻力增大），需及时更换（一般每 500-1000 次进样更换 1 次）。

4. 色谱柱保护

• 色谱柱使用前需确认流动相兼容性（避免使用与固定相反应的溶剂），并按柱说明书设定柱温（±1℃ 稳定）。

• 样品需经 0.22 μm 滤膜过滤（或离心 12000 rpm/10 min），去除颗粒物，防止堵塞色谱柱筛板。

• 实验结束后，用梯度洗脱方式冲洗色谱柱：先以 10% 有机相冲洗 10 柱体积（去除缓冲盐），再用 90% 有机相冲洗 15 柱体积（去除强保留杂质），最后以 50% 有机相平衡色谱柱，密封保存（反相柱用甲醇 / 乙腈，正相柱用正己烷）。

（二）质谱（MS/MS）部分

1. 离子源清洁与检查

• 喷针：用甲醇或异丙醇擦拭外壁，若堵塞可将针尖浸入甲醇 - 水（1:1）超声 5 min（避免超声时间过长损坏喷针）。

• 锥孔 / 毛细管：用蘸有甲醇的无尘纸轻轻擦拭，或用 5% 硝酸溶液浸泡 10 min（去除金属残留），再用超纯水冲洗、烘干（60℃ 烘箱 30 min）。

• 每次实验前，目视检查离子源喷针、锥孔（或毛细管）是否有结晶、残留（表现为质谱响应降低、基线噪音增大），若有污染需及时清洁。

• 清洁方法：

• 检查离子源气体（氮气 / 氩气）压力：雾化气、干燥气压力需符合仪器要求（一般雾化气 0.3-0.5 MPa，干燥气 0.2-0.4 MPa），气体需经分子筛过滤（去除水分、油雾）。

2. 质量轴校准

• 每次开机后，需进行质量轴校准（使用仪器专用校准液，如 Pierce LTQ Velos 校准液、Agilent ESI Tuning Mix），确保质荷比（m/z）准确性（误差≤±0.1 Da）。

• 若实验过程中出现峰漂移、定性错误，需重新校准质量轴。

3. 真空系统检查

• 开机后观察真空度：质谱真空系统（机械泵 + 分子泵）需达到设定真空值（一般一级真空＜10⁻³ mbar，二级真空＜10⁻⁶ mbar），若真空度无法达标（可能是密封圈老化、真空阀故障、分子泵损坏），需停机排查。

• 机械泵维护：检查机械泵油位（需在油标上下限之间），若油色变深、浑浊（一般每 6-12 个月），需更换机械泵油（使用仪器专用油，如 Edwards Ultragrade 19）；更换后需运行机械泵 30 min 排气。

4. 检测器保护

• 避免高浓度样品直接进样（样品浓度需匹配仪器检测范围，一般 ng/mL-μg/mL 级别），防止检测器饱和损坏。

• 实验结束后，继续通干燥气 15-30 min，吹干离子源内部残留溶剂，避免水分凝结影响真空系统。

二、定期保养（每周 / 每月 / 每季度 / 每年）

（一）每周保养

1. 清洗溶剂瓶与进样器样品环：用甲醇 - 水（1:1）超声清洗溶剂瓶（10 min），进样器样品环用 100% 甲醇冲洗 20 min（流速 0.5 mL/min）。

2. 检查色谱柱性能：通过进样标准品（如利血平），观察保留时间 RSD（≤1%）、峰面积 RSD（≤3%）、理论塔板数（需符合柱说明书要求），若性能下降需进行柱再生（反相柱：用甲醇 - 乙腈 - 水 = 50:40:10 冲洗 20 柱体积）。

3. 清洁离子源腔体：拆除离子源组件，用甲醇擦拭腔体内部，去除残留污染物，晾干后重新安装。

（二）每月保养

1. 更换泵密封垫与单向阀：若泵压力波动大、漏液，需更换泵头密封垫（一般每 3-6 个月）；单向阀若出现堵塞（表现为流速不稳），用甲醇超声清洗 10 min，或直接更换。

2. 检查质谱传输线：传输线若有残留，用蘸有甲醇的无尘纸擦拭，避免污染物进入质量分析器。

3. 校准流速准确性：用容量瓶校准泵流速（设定流速 1.0 mL/min，收集 10 min 流出液，称重计算实际流速，误差≤±2%）。

4. 更换氮气 / 氩气钢瓶：若钢瓶压力低于 0.5 MPa，及时更换，更换后 purge 管路 5 min，去除空气。

（三）每季度保养

1. 更换色谱柱筛板：若色谱柱压力持续升高，且冲洗后无改善，可能是筛板堵塞，需更换色谱柱入口筛板（按柱型号匹配）。

2. 清洁质量分析器：对于三重四极杆质谱，需清洁四极杆电极（用甲醇擦拭，避免划伤电极表面）；若仪器配备碰撞池（如 Q2），需检查碰撞气（氩气）流量，确保碰撞效率稳定。

3. 检查机械泵密封圈：若机械泵出现漏油、真空度下降，需更换密封圈（使用仪器专用配件）。

4. 验证仪器检出限与精密度：进样低浓度标准品（接近检出限），计算检出限（S/N≥3）与精密度（峰面积 RSD≤5%），确保仪器性能达标。

（四）每年保养（建议由厂家工程师执行）

1. 更换分子泵：分子泵使用寿命一般为 5000-8000 小时，若出现真空度下降、噪音增大，需更换分子泵。

2. 全面清洁质谱腔体：拆除质量分析器、检测器等核心部件，专业清洁内部残留污染物（如离子源逸散的盐类、有机物）。

3. 校准检测器响应：使用标准品校准检测器灵敏度，确保线性范围（一般 R²≥0.995）。

4. 检查电路系统：排查仪器主板、电源、连接线是否有老化、松动，确保电路安全稳定。

三、关键部件维护要点

（一）色谱柱

• 禁止使用pH 流动相（反相柱一般 pH 2-8，正相柱 pH 3-7），避免固定相水解。

• 避免骤冷骤热：柱温变化速率≤5℃/min，防止色谱柱填料塌陷。

• 长期不用时，需密封保存于阴凉干燥处，避免阳光直射。

（二）离子源

• 不同离子源（ESI、APCI、MALDI）维护差异：

• ESI 源：重点清洁喷针、毛细管，避免缓冲盐结晶（建议流动相中缓冲盐浓度≤10 mM）。

• APCI 源：清洁加热毛细管与 corona 放电针，防止有机物碳化残留。

• MALDI 源：清洁样品靶（用甲醇擦拭，或超声清洗），避免样品交叉污染。

• 离子源温度控制：干燥气温度需高于流动相沸点 10-20℃，防止溶剂冷凝（如甲醇流动相，干燥气温度≥50℃）。

（三）真空系统

• 机械泵：避免频繁启停（每次停机后需间隔 30 min 再开机），防止泵油乳化。

• 分子泵：运行时禁止触碰，避免震动影响真空稳定性；若遇突然停电，需关闭仪器电源，待来电后按程序重启（先开机械泵，待真空达标后再开分子泵）。

（四）检测器

• 避免长时间暴露在高浓度离子流中（如连续进样高浓度标准品），防止检测器疲劳。

• 若检测器响应降低，可清洁检测器窗口（用甲醇擦拭），或联系厂家进行检测器校准。

四、故障预防与注意事项

1. 实验室环境控制

2. 温度：20-25℃（波动≤±2℃），避免靠近热源（如烘箱、空调出风口）。

3. 湿度：40%-60%，湿度过高易导致仪器内部结露、电路短路；湿度过低易产生静电，影响质谱信号。

4. 电源：使用稳压电源（电压 220V±10%，频率 50Hz±1Hz），避免电压波动损坏仪器。

5. 
   

6. 操作规范

7. 严格按仪器操作规程开机 / 关机：开机顺序（LC→MS 机械泵→MS 分子泵→真空达标→校准→实验）；关机顺序（停止进样→冲洗 LC 管路与色谱柱→关闭 MS 离子源→关闭分子泵→待真空释放后关闭机械泵→关闭 LC）。

8. 禁止在真空未达标时进样，禁止用强腐蚀性溶剂（如浓盐酸、氢氧化钠溶液）作为流动相。

9. 样品前处理需规范：避免样品中含有高浓度盐、强氧化性物质（如过氧化氢），防止损坏离子源与色谱柱。

10. 常见故障预警与处理

    故障现象	可能原因	预防措施
    泵压力骤升	管路堵塞、色谱柱筛板堵塞	样品过滤、定期冲洗管路、更换色谱柱筛板
    质谱响应降低	离子源污染、质量轴漂移	每日清洁离子源、定期校准质量轴
    峰形拖尾 / 分裂	色谱柱污染、进样量过大	柱再生、减少进样量、优化流动相 pH
    真空度不达标	密封圈老化、机械泵油污染	定期更换密封圈与机械泵油、检查真空阀
    定性错误	质量轴偏移、标准品失效	每日校准质量轴、使用新鲜标准品

五、维护记录与台账

1. 日常维护：日期、操作人员、流动相配制情况、离子源清洁情况、质量轴校准结果。

2. 定期保养：周期、保养项目（如更换密封垫、清洁质量分析器）、更换部件型号与数量。

3. 故障记录：故障现象、排查过程、解决方案、维修人员（厂家 / 内部）。

4. 仪器状态：压力、真空度、标准品保留时间 / 峰面积、检出限等关键参数。

总结